Kuinka mitata bakteerien kasvua

Sisältö

• vaiheet
• Menetelmä 1 Tarkkaile bakteereja suoraan
• Menetelmä 2 Biomassan mittaus
• Menetelmä 3 Jatka turbidimetrisesti

Tässä artikkelissa: Bakteerien havaitseminen suoraan. Mittaa biomassaa. Suorita sameusmittaus8. Viitteet

Bakteerien kasvua voidaan mitata monella tapaa, ja jotkut niistä ovat vaikeampia kuin toiset toteuttaa. Yksinkertaisimpia käytetään yleensä ja ne antavat suhteellisen tarkkoja tuloksia, jos ne ovat tiukat mittausten aikana. Yleisimmät tekniikat ovat bakteerien havaitseminen ja laskeminen, biomassan ja kuiva-biomassan mittaus ja sameusmittaus. Koululaboratoriossasi tulisi olla ainakin yhtä näistä menetelmistä tarvittavat laitteet.

vaiheet

Menetelmä 1 Tarkkaile bakteereja suoraan

1. 
   

   
   Valmistele laite. Sen lisäksi, mitä kaikissa biologian laboratorioissa yleensä löytyy, tarvitset joitain erityisiä esineitä. Varmista, että kaikki instrumentit ja säilytysastiat ovat hyppysissäsi, jotta sinun ei tarvitse mennä edestakaisin kaapissa, jossa laitteita varastoidaan. Mieti etukäteen, mitä aiot tehdä tietääksesi, mitä käytät jokaisessa vaiheessa. Sinun on myös tiedettävä joitain keskeisiä termejä.
   • Hanki hemasytometri. Se on numerokammioilla varustettu terä, joka liittyy mikroskooppiin. Se on erittäin helppo instrumentti säätää ja käyttää. Löydät joitain toimittajilta, jotka erikoistuvat koulujen ja tutkimuslaboratorioiden laitteisiin. Yleensä toimitetaan käyttöohje.
   • Ota petrimalja. Tämä on pieni, pyöreä, matala säiliö, jossa voit tarkkailla bakteereja.
   • Termi "viljelmä" viittaa mikro-organismiin, jota levitetään keinotekoisesti osana tieteellistä koetta.
   • "Kulttuuriliemi" on väliaine, jolla kulttuuri kehittyy.

2. 
   

   
   
   
   Käytä petrimaljaa. Laita bakteerit laatikkoon ja tarkkaile sitä mikroskoopin alla. Voit myös laittaa sen suoraan dioille. Laske sitten läsnä olevien bakteerisolujen lukumäärä.

3. 
   

   
   Varmista, että keskittymä on oikea. Jos bakteereja on liikaa, ne limittyvät, etkä voi laskea niitä oikein. Jos näin on, laimenna viljelmä sekoittamalla se pienellä liemellä. Jos niitä on liian vähän, tulos ei ole merkittävä. Sen jälkeen sinun on suodatettava liemi pitoisuuden lisäämiseksi.

4. 
   

   
   Laske bakteerit. Viimeinen vaihe on yksinkertaisesti laskea. Katso mikroskoopin alla olevia lukumääriä ja merkitse näkemäsi solumäärä. Vertaa tulosta muihin vastaaviin kokemuksiin.

Menetelmä 2 Biomassan mittaus

1. 
   

   
   
   
   Tarkista, että sinulla on tarvittavat instrumentit. Tämän menetelmän toteuttaminen on hidasta, ja siihen sisältyy kalliiden laitteiden käyttö. Jos et pese sitä, käytä toista tekniikkaa. Toisaalta, jos laboratoriossasi, jolla olet, on oikeat työkalut, biomassan ja kuivapainon mittaus on ihanteellinen, koska se antaa tarkkoja tuloksia. Tarvitset:
   • pakkokonvektion hydraulinen uuni,
   • alumiininen punnitusastia,
   • useita Erlenmeyer-pulloja,
   • sentrifugi tai laboratoriosuodatusjärjestelmä.

2. 
   

   
   Tarkista, että sato on Erlenmeyer-pullossa. Jos näin ei ole, kaada se sisään. Kokeen tässä vaiheessa bakteerit ovat edelleen viljelmäliemessä. Ne erotetaan myöhemmin.

3. 
   

   
   Kuivaa punnitusastia. Tätä varten aseta se uuniin. Voit käyttää myös halkaisijaltaan 47 mm: n selluloosa-asetaattikalvosuodatinta, joiden huokoset ovat 0,45 μm. Riippumatta siitä, mitä työkalua käytetään, mittaa sen massa tarkasti, jotta se voidaan vähentää tuloksista, jotka saat, kun sato asetetaan siihen.

4. 
   

   
   Mix. Sekoita lerlenmeyerä niin, että viljelmä on homogeenista. Itse asiassa soluilla on luonnollisesti taipumus pudota säiliön pohjalle painovoiman vuoksi. Joten sinun on ravistettava vähän, sillä jakelu on tasaista ja näyte on edustavampi.

5. 
   

   
   Sentrifugia. Erota bakteerit sentrifugilla viljelmäliemestä. Tätä laitetta käytetään kääntämään kontti ja vastapaino erittäin suurella nopeudella. Liemi virtaa, mikä pitää vain elävän aineen. Lisätietoja on sentrifugin käytöstä Internetissä.

6. 
   

   
   Hanki taikina. Pudota se vaa'alle. Voit heittää viljelyliemeen, et tarvitse sitä enää, mutta pidä lerlenmeyer käsillä.

7. 
   

   
   Huuhtele sentrifugi. Kaada huuhteluvesi punnitusastiaan bakteerisolujen lisäksi. Kaikesta saatu tulos antaa sinulle biomassan.

8. 
   

   
   Etsi kuiva massa. Jos haluat tietää näytteesi kuiva biomassan, aseta punnitusastia uuniin, joka on asetettu 100 ° C: seen, 6–24 tunniksi, laitteen mukana toimitettujen ohjeiden mukaisesti. Ole varovainen, ettet ylitä tätä lämpötilaa, jotta vältyt bakteereilta. Punnitse sitten kaikki, vähennä sitten tason massa.

Menetelmä 3 Jatka turbidimetrisesti

1. 
   

   
   Valmista laitteesi. Tarvitset valonlähteen ja spektrofotometrin, useimmista tiedelaboratorioista löytyvän laitteen. Katso mukana toimitetusta käyttöohjeesta, koska jokaisella mallilla on oma toiminta. Tämä menetelmä on yksi yleisimmin käytettyjen bakteerien kasvun mittaamiseen, koska se vaatii vain edullisia ja helppokäyttöisiä työkaluja.

2. 
   

   
   Tuo valoa kulttuuriin. Sameutta käytetään arvioimaan nesteen pitoisuutta hiukkasissa, sen määrä määritetään onko se enemmän tai vähemmän sameaa. Tulos, jonka saat tästä mittauksesta, annetaan NTU (tai nephelometrinen sameusyksikkö). Laitteen kalibrointi voi olla tarpeen näytteen sameuden mittaamiseksi tarkasti.

3. 
   

   
   Tee muistiinpanoja. Sameus on näytteessä olevien bakteerien määrä. Spektrofotometri antaa sinulle myös tietää liuoksen läpäisevyyden (% T), jonka arvo on käänteisesti verrannollinen sameuteen. Vertaa sitten eri näytteistä saatuja tuloksia bakteerikasvun mittaamiseksi.